দ্রুত পিসিআর পরীক্ষা পানীয় জলের দূষণ সনাক্ত করে

একটি নতুন আণবিক ডায়গনিস্টিক পদ্ধতি পানীয় জলে মল দূষণ সনাক্ত করার জন্য প্রয়োজনীয় সময়কে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করতে পারে, গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে অন্ত্রের এন্টারোকোকি মাত্র 3-4 ঘন্টার মধ্যে সনাক্ত করা যায়।

রিয়েল-টাইম রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন (RT-PCR) অ্যাসে 94.6% সংবেদনশীলতা প্রদর্শন করেছে, যা প্রচলিত সংস্কৃতি পদ্ধতির জন্য 89.2% এর তুলনায়, যার জন্য সাধারণত 24-48 ঘন্টা প্রয়োজন। ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে দ্রুত আণবিক পরীক্ষা সম্ভাব্য দূষণের ঘটনাগুলির পূর্বে সনাক্তকরণ এবং জনস্বাস্থ্য সুরক্ষা উন্নত করতে সহায়তা করতে পারে।

পানীয় জল দূষণ সনাক্তকরণ উন্নত

অন্ত্রের এন্টারোকোকি পানীয় জলে মল দূষণের সূচক হিসাবে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়, জলের ইউটিলিটিগুলিকে মাইক্রোবায়োলজিক্যাল নিরাপত্তা মূল্যায়ন করতে এবং গ্রাহকদের সম্ভাব্য ঝুঁকি চিহ্নিত করতে সহায়তা করে।

যাইহোক, প্রচলিত সংস্কৃতি-ভিত্তিক শনাক্তকরণ পদ্ধতিগুলির ফলাফল তৈরি করতে প্রায় 24-48 ঘন্টা প্রয়োজন, সম্ভাব্য দূষণের ঘটনাগুলির প্রতিক্রিয়াগুলিকে বিলম্বিত করে।

এই সীমাবদ্ধতা মোকাবেলার জন্য, গবেষকরা ব্যাকটেরিয়া 16S রাইবোসোমাল আরএনএ (rRNA) লক্ষ্য করে একটি রিয়েল-টাইম RT-PCR অ্যাস তৈরি করেছেন, যা অন্ত্রের এন্টারোকোকির দ্রুত সনাক্তকরণ সক্ষম করে।

পদ্ধতিটি দশটি সনাক্ত করার জন্য ডিজাইন করা হয়েছিল এন্টারোকোকাস মানুষ এবং পশুর মল এবং পানীয় জলের নমুনায় তাদের প্রাদুর্ভাবের জন্য নির্বাচিত প্রজাতি।

গবেষকরা 100 মিলি পানীয় জলের নমুনা পরিস্রাবণের মাধ্যমে প্রক্রিয়াজাত করেছেন, তারপরে লাইসোজাইম চিকিত্সা, আরএনএ নিষ্কাশন এবং এক-ধাপে রিয়েল-টাইম RT-PCR।

রেফারেন্স হিসাবে প্রতিষ্ঠিত ISO 7899-2:2000 সংস্কৃতি পদ্ধতি ব্যবহার করে, ISO 16140-2:2016 মান অনুযায়ী পরীক্ষাটি যাচাই করা হয়েছিল। বৈধতার মধ্যে কৃত্রিমভাবে দূষিত পানীয় জল, দূষিত নমুনা এবং একটি ইন্টারল্যাবরেটরি অধ্যয়ন অন্তর্ভুক্ত।

আণবিক পরীক্ষা উচ্চ সংবেদনশীলতা প্রদর্শন করে

আরটি-পিসিআর পদ্ধতিটি 94.6% এর সংবেদনশীলতা অর্জন করেছে, যা রেফারেন্স সংস্কৃতি পদ্ধতির জন্য রিপোর্ট করা 89.2% সংবেদনশীলতাকে সামান্য অতিক্রম করেছে।

সনাক্তকরণের সম্মিলিত আপেক্ষিক সীমা (RLOD) ছিল 0.851, যা দুটি পদ্ধতির মধ্যে বিস্তৃতভাবে তুলনীয় সনাক্তকরণ ক্ষমতা নির্দেশ করে, এর জন্য সামান্য উন্নত সংবেদনশীলতা সহ Enterococcus faecium RT-PCR ব্যবহার করে।

অন্তর্ভুক্তি পরীক্ষা নিশ্চিত করেছে যে আণবিক পরীক্ষা সফলভাবে লক্ষ্যযুক্ত দশটি সনাক্ত করেছে এন্টারোকোকাস প্রজাতি

গুরুত্বপূর্ণভাবে, এক্সক্লুসিভিটি টেস্টিং অ-টার্গেট ব্যাকটেরিয়াগুলির সাথে কোনও ক্রস-প্রতিক্রিয়া প্রদর্শন করেনি, যা পরীক্ষার নির্দিষ্টতাকে সমর্থন করে।

ইন্টারল্যাবরেটরি বৈধতাও অংশগ্রহণকারী পরীক্ষাগারগুলিতে সামঞ্জস্যপূর্ণ কর্মক্ষমতা নিশ্চিত করেছে, পরামর্শ দেয় যে পদ্ধতিটি একটি একক পরীক্ষার সুবিধার বাইরেও পুনরুত্পাদনযোগ্য হতে পারে।

জল নেটওয়ার্ক মেরামত অনুসরণ করে দ্রুত ফলাফল

গবেষকরা অতিরিক্তভাবে বিতরণ নেটওয়ার্কগুলির মেরামত করার পরে সংগৃহীত পানীয় জলের নমুনাগুলি ব্যবহার করে পরীক্ষাটি মূল্যায়ন করেছেন, একটি সেটিং যেখানে সময়মত মাইক্রোবায়োলজিক্যাল পর্যবেক্ষণ বিশেষভাবে গুরুত্বপূর্ণ।

RT-PCR এবং প্রচলিত সংস্কৃতি পদ্ধতি 91.8% চুক্তি প্রদর্শন করেছে, যা দুটি পদ্ধতির মধ্যে যথেষ্ট সামঞ্জস্যতা নির্দেশ করে।

যাইহোক, আরটি-পিসিআর রেফারেন্স কালচার পদ্ধতির চেয়ে বেশি ঘন ঘন অন্ত্রের এন্টারোকোকি সনাক্ত করেছে, পরামর্শ দেয় যে আণবিক পরীক্ষা অতিরিক্ত ইতিবাচক নমুনা সনাক্ত করতে পারে।

সবচেয়ে উল্লেখযোগ্য সুবিধা ছিল পরীক্ষার সময় হ্রাস। যদিও প্রচলিত সংস্কৃতি পদ্ধতির জন্য 24-48 ঘন্টা প্রয়োজন, RT-PCR অ্যাস প্রায় 3-4 ঘন্টার মধ্যে ফলাফল তৈরি করে।

এই সংক্ষিপ্ত পরিবর্তন পানীয় জলের ইউটিলিটিগুলিকে সন্দেহজনক মল দূষণের আরও দ্রুত তদন্ত করতে এবং অতিরিক্ত নমুনা বা প্রতিরক্ষামূলক ব্যবস্থা সম্পর্কে আগে সিদ্ধান্ত নিতে পারে।

পানীয় জল নিরাপত্তা জন্য প্রভাব

অনুসন্ধানগুলি মাইক্রোবায়োলজিক্যাল পানীয় জল পর্যবেক্ষণের গতি এবং দক্ষতা উন্নত করার জন্য আণবিক ডায়গনিস্টিকসের সম্ভাব্য মান হাইলাইট করে।

উচ্চ বিশ্লেষণাত্মক সংবেদনশীলতার সাথে একটি যথেষ্ট কম সময়ের ফলাফলের সাথে একত্রিত করে, RT-PCR অ্যাস বিদ্যমান পর্যবেক্ষণ কৌশলগুলির পরিপূরক হতে পারে, বিশেষ করে যখন অবকাঠামো মেরামত বা সন্দেহজনক দূষণের ঘটনাগুলির পরে দ্রুত তথ্যের প্রয়োজন হয়।

তা সত্ত্বেও, ব্যাকটেরিয়া RNA সনাক্তকরণ অগত্যা প্রমাণ করে না যে কার্যকরী জীব বিদ্যমান। আণবিক-ইতিবাচক, সংস্কৃতি-নেতিবাচক ফলাফলের প্রভাব তাই সতর্কতার সাথে ব্যাখ্যার প্রয়োজন, বিশেষ করে সম্ভাব্য স্বাস্থ্য ঝুঁকি মূল্যায়ন করার সময়।

গবেষকরা উপসংহারে পৌঁছেছেন যে যাচাইকৃত পরীক্ষাটি সনাক্তকরণের সময়কে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করার সময় প্রচলিত সংস্কৃতি পদ্ধতির সাথে তুলনীয় নির্ভরযোগ্য কর্মক্ষমতা প্রদর্শন করেছে।

এর বাস্তবায়ন সন্দেহভাজন দূষণের জন্য দ্রুত কার্যকরী প্রতিক্রিয়া সমর্থন করতে পারে এবং পানীয় জলের নিরাপত্তা পর্যবেক্ষণকে শক্তিশালী করতে পারে, যদিও নিয়মিত নজরদারিতে ব্যবহারিক একীকরণের জন্য পরীক্ষাগারের ক্ষমতা এবং নিয়ন্ত্রক প্রয়োজনীয়তা বিবেচনার প্রয়োজন হবে।

রেফারেন্স

Heijnen L et al. একটি 16S rRNA রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেজ-পিসিআর পদ্ধতি যাতে বিতরণ করা পানীয় জলে অন্ত্রের এন্টারোকোকি দ্রুত সনাক্ত করা যায়, জার্নাল অফ অ্যাপ্লায়েড মাইক্রোবায়োলজি, ভলিউম 137, ইস্যু 10, অক্টোবর 2026, lxag234,